根据性接触史、临床表现（如初发生外生殖器结节，特异性的边缘隆起，牛肉红色无痛性肉芽肿溃疡）及实验室检查和病理检查可确诊。即在病变边缘部穿刺活检，或行深部切开取一小块组织，用两块玻片将标本压碎，自然干燥、甲醛固定，再用Wright或Giemsa染色镜检，在大单核细胞浆的囊性间隙区内可见杜诺凡小体。